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引言

Claudins（CLDNs）是跨膜蛋白，在健康組織中促進上皮細胞極性和緊密連接完整性。CLDNs在多種實體瘤中頻繁過表達，且其表達與腫瘤亞型、分級和預(yù)后相關(guān)。CLDNs的失調(diào)表達調(diào)節(jié)致癌信號傳導(dǎo)，并促進腫瘤增殖、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）、干性、纖維化、免疫調(diào)節(jié)和治療耐藥性。由于其頻繁過表達和在癌癥生物學(xué)中的功能作用，CLDNs已成為有吸引力的治療靶點。其表面表達可被利用以引導(dǎo)療法進入腫瘤內(nèi)部。例如，一種靶向CLDN18.2亞型的單克隆抗體已獲得臨床批準(zhǔn)，驗證了CLDN導(dǎo)向方法的潛力。針對多個CLDN家族成員的其他策略，如抗體藥物偶聯(lián)物、雙特異性及三特異性抗體和嵌合抗原受體（CAR）T細胞正在開發(fā)中。靶向CLDN胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域或其下游信號傳導(dǎo)以破壞其生物學(xué)功能可能提供進一步的希望。

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一、Claudins的結(jié)構(gòu)、功能與分類

緊密連接是介導(dǎo)上皮細胞間細胞黏附、細胞極性和信號傳導(dǎo)的基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)。這些多蛋白復(fù)合物由跨膜成分、相關(guān)的細胞質(zhì)支架和調(diào)節(jié)蛋白組成。緊密連接具有三種主要功能：屏障功能，封閉旁細胞空間并調(diào)節(jié)離子和溶質(zhì)通量；柵欄功能，通過防止頂膜和基底側(cè)膜結(jié)構(gòu)域的混合來維持細胞極性；信號傳導(dǎo)功能，傳遞環(huán)境信號以適應(yīng)細胞反應(yīng)和功能。

Claudins（CLDNs）是形成緊密連接蛋白復(fù)合物的關(guān)鍵成分，作為結(jié)構(gòu)和信號成分發(fā)揮作用。在人類中，CLDN家族包含23個成員，所有成員都具有四個跨膜結(jié)構(gòu)域的保守膜結(jié)構(gòu)，但表現(xiàn)出多樣的組織特異性表達模式和不同的功能作用。每個蛋白包含四個α-螺旋跨膜結(jié)構(gòu)域、兩個細胞外環(huán)（ECL1和ECL2）以及胞質(zhì)N末端和C末端尾部。ECL1包含一個保守的甘氨酸、亮氨酸、色氨酸（GLW）基序和兩個形成分子內(nèi)二硫鍵的半胱氨酸殘基，兩者對結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和緊密連接組裝至關(guān)重要。由于其保守的結(jié)構(gòu)、序列基序和功能相關(guān)性，ECL1經(jīng)常成為藥物開發(fā)的靶點。ECL2促進相鄰細胞間的CLDN-CLDN相互作用，支持緊密連接鏈的形成。大多數(shù)CLDN具有C末端PDZ結(jié)合基序，該基序介導(dǎo)與細胞內(nèi)支架蛋白（如閉鎖小帶蛋白1（ZO1）、ZO2和ZO3）的相互作用。這些復(fù)合物將CLDNs錨定至肌動蛋白細胞骨架，并作為信號整合平臺。

CLDNs可大致分為形成屏障的CLDNs（增強緊密連接完整性）和形成通道的CLDNs（產(chǎn)生選擇性旁細胞離子孔）。近期研究提出了四種機制類別：第1類CLDNs（如CLDN1、CLDN3、CLDN7、CLDN9、CLDN11、CLDN14、CLDN18.1和CLDN19）作為自主屏障形成蛋白；第2類CLDNs（如CLDN2、CLDN10A、CLDN10B和CLDN15）作為自主通道形成蛋白；第3類CLDNs（如CLDN8、CLDN12、CLDN16、CLDN17等）是非自主的，需要共表達的CLDNs整合到現(xiàn)有連接中；第4類，以CLDN18.2為代表，在中性條件下形成弱鏈，但表現(xiàn)出酸增強的連接組裝，反映了其在胃中的生理特化。

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二、CLDNs在癌癥中的表達與調(diào)節(jié)

CLDNs在癌癥中經(jīng)常失調(diào)，表現(xiàn)為異常過表達和/或在癌細胞表面重新分布到非連接膜區(qū)域，使其成為治療干預(yù)的可及靶點。CLDN過表達在許多上皮癌中很常見。從治療角度來看，最相關(guān)的CLDN表達模式涉及顯著上調(diào)或異常的亞細胞定位，特別是重新分布到典型緊密連接之外的膜區(qū)室，使CLDNs可及治療性抗體。

在不同實體瘤中，CLDNs可表現(xiàn)出瘤內(nèi)異質(zhì)性。例如，胃癌中CLDN18.2的研究顯示，約60%的病例存在瘤內(nèi)異質(zhì)性。此外，原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性癌組織可能存在差異，高達25%的病例顯示CLDN18.2表達不一致。在各種轉(zhuǎn)移器官部位中，腹膜病變的CLDN18.2陽性率（44.3%）和陽性一致率（31.4%）最高，而肝臟病變的陽性率（17.9%）和一致率（12.8%）最低。

CLDNs失調(diào)的機制包括遺傳改變、轉(zhuǎn)錄重編程和表觀遺傳修飾。在遺傳改變方面，對TCGA數(shù)據(jù)的分析表明，CLDN基因在多種腫瘤類型中可能發(fā)生改變，拷貝數(shù)變異的發(fā)生頻率遠高于點突變�；�因融合事件也見于各種腫瘤類型，一個顯著的例子是CLDN18與ARHGAP26的融合，主要在胃腺癌中檢測到，其在印戒細胞癌中的患病率高達17%。這種重排導(dǎo)致CLDN18的截斷并與ARHGAP26的RhoGAP結(jié)構(gòu)域融合，已知其促進上皮屏障破壞和致癌YAP-TAZ信號傳導(dǎo)，支持其作為潛在驅(qū)動事件和治療靶點的作用，特別是在胃食管癌中。

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)方面，與癌癥相關(guān)的環(huán)境因素（如促炎信號和缺氧）已顯示可調(diào)節(jié)CLDN表達。例如，腫瘤壞死因子（TNF）通過MAPK或核因子-κB（NF-κB）轉(zhuǎn)錄激活誘導(dǎo)多種CLDNs（最顯著的是CLDN1）的表達。表觀遺傳調(diào)節(jié)方面，啟動子高甲基化與幾種情況下的CLDN沉默有關(guān)，例如在腎癌中CLDN10B的高甲基化與侵襲性疾病和不良預(yù)后相關(guān)。

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三、CLDNs在癌癥生物學(xué)中的功能作用

CLDNs的失調(diào)表達通過激活調(diào)節(jié)細胞侵襲、失巢凋亡和細胞外基質(zhì)重塑的信號通路影響EMT和轉(zhuǎn)移。例如，在肝膽和胃腸道癌細胞模型中，CLDN1通過ABL-ERK和NOTCH1信號傳導(dǎo)誘導(dǎo)EMT和侵襲。在結(jié)直腸癌和胃癌中，來自細胞系和異種移植的證據(jù)表明，CLDN1通過增強對失巢凋亡的抗性進一步促進轉(zhuǎn)移擴散。

多個研究表明，CLDNs調(diào)節(jié)癌癥的上皮分化、干性和可塑性，通常通過參與控制祖細胞樣狀態(tài)的發(fā)育通路。例如，在肝細胞癌（HCC）中，基于細胞模型的CLDN1過表達通過JAG1的并置接觸激活NOTCH促進干性。CLDN2也被證明參與調(diào)節(jié)結(jié)直腸癌的可塑性，其過表達促進球體自我更新，富集高醛脫氫酶活性的細胞群，促進起始和轉(zhuǎn)移。

幾種CLDNs的過表達已顯示在多種癌癥類型中與治療耐藥性功能相關(guān)，其通過維持促生存信號、限制藥物滲透和/或促進表型可塑性實現(xiàn)。在結(jié)直腸癌中，CLDN1是一種治療誘導(dǎo)的耐藥因子，化療（特別是奧沙利鉑）通過MAPK–p38–GSK3β–WNT–β-catenin軸誘導(dǎo)CLDN1。在肝細胞癌中，CLDN6通過破壞Hippo-YAP信號傳導(dǎo)促進索拉非尼耐藥�？笴LDN1和CLDN6抗體不僅通過升高的CLDN1和CLDN6表達識別腫瘤細胞，還抑制下游致癌胞內(nèi)信號通路，是結(jié)合兩種方法的策略示例。

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四、靶向CLDNs的臨床治療開發(fā)

目前的臨床開發(fā)主要集中在CLDN1、CLDN6、CLDN4和CLDN18.2，利用包括單克隆抗體、ADC、雙特異性和三特異性抗體或CAR T細胞在內(nèi)的多種平臺。治療策略可大致分為兩類：利用癌細胞表面可及的、非連接的CLDN過表達以介導(dǎo)免疫或細胞毒性殺傷，例如靶向CLDN18.2的單克隆抗體；靶向涉及腫瘤進展的CLDN依賴性胞內(nèi)信號通路，例如靶向CLDN1的PDZ結(jié)構(gòu)域抑制劑。

CLDN18.2：處于CLDN導(dǎo)向療法的前沿

Zolbetuximab是一種誘導(dǎo)抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒性（ADCC）和補體依賴性細胞毒性的單克隆抗體，在CLDN18.2陽性的胃食管腺癌患者中與化療聯(lián)合顯示出改善的無進展生存期（PFS）和總生存期（OS），并于2024年獲得FDA批準(zhǔn)。這一里程碑式的批準(zhǔn)驗證了CLDN18.2作為治療靶點，并為后續(xù)基于CLDN的療法奠定了基礎(chǔ)。兩項III期試驗的聯(lián)合分析顯示，zolbetuximab組的中位PFS為9.2個月，對照組為8.2個月；中位OS分別為16.4個月和13.7個月，客觀緩解率（ORR）為45.5%，完全緩解率為6%。

其他治療平臺也在開發(fā)中。ADC如sonesitatug vedotin、IBI343和SHR-A1904將細胞毒性載荷直接遞送至CLDN18.2陽性細胞，并在早期研究中顯示出有前景的療效，ORR范圍在24%至29%之間。雙特異性抗體和T細胞接合器，如Q-1802、ASP2138和givastomig，通過CD3募集T細胞或通過PDL1或4-1BB調(diào)節(jié)免疫通路以增強免疫介導(dǎo)的腫瘤細胞殺傷。CAR T細胞療法在CLDN18.2陽性的胃食管腺癌中顯示出臨床活性，在一項開放標(biāo)簽II期試驗中，CLDN18.2特異性CAR T細胞優(yōu)于研究者選擇的化療，ORR為35%，中位緩解持續(xù)時間為3.88個月，PFS為3.25個月。

CLDN6：利用癌癥限制性表達

類似于CLDN18.2，CLDN6在成人正常組織中表達有限，使其成為高度腫瘤限制性候選抗原。CLDN6主要在生殖細胞瘤、子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌中表達，這是探索多種治療方法的基礎(chǔ)。CAR T細胞療法BNT211結(jié)合了CLDN6特異性CAR和旨在增強T細胞持久性和抗腫瘤功效的自擴增RNA疫苗（CARVac），在CLDN6陽性實體瘤的I/II期研究中顯示出33%的緩解率。

CLDN1：靶向癌癥和纖維化中的雙重作用

CLDN1在多種腫瘤中廣泛表達，如HCC、膽管癌、結(jié)直腸癌、非小細胞肺癌、尿路上皮癌、食管癌、宮頸癌和頭頸部鱗狀細胞癌。其致癌作用由表面暴露的、非連接的表達驅(qū)動。靶向CLDN1的治療策略包括結(jié)合暴露于癌細胞表面的非連接形式蛋白的單克隆抗體，在此類CLDN1陽性癌癥模型中顯示出強效的臨床前活性。值得注意的是，CLDN1靶向療法已進入早期臨床評估（I/II期），用于CLDN1陽性實體瘤，如CLDN1導(dǎo)向的ADC ALE.P02和ALE.P03。此外，抗CLDN1抗體顯示出強效的抗纖維化作用，使其可能對纖維化相關(guān)的CLDN1陽性癌癥（如HCC和肝內(nèi)膽管癌）有價值。

CLDN4：靶向上皮癌

CLDN4在上皮癌中廣泛表達，如胰腺癌、結(jié)直腸癌、卵巢癌、胃癌、膀胱癌和乳腺癌。雙特異性抗體ASP1002是首個臨床階段的CLDN4靶向療法，目前正在實體瘤的I期試驗中進行研究。通過同時結(jié)合CLDN4和共刺激受體4-1BB，ASP1002旨在增強T細胞增殖和活化。

靶向CLDN胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域和通路的策略

雖然胞外結(jié)構(gòu)域一直是治療開發(fā)的主要焦點，但胞內(nèi)CLDN結(jié)構(gòu)域，特別是C末端結(jié)構(gòu)域和PDZ結(jié)合基序，代表了破壞CLDN驅(qū)動的致癌信號傳導(dǎo)的另一途徑。靶向CLDN1的小分子，如N-phenylcarbamothioyl-2-naphthamide衍生物（例如PDS-0330），在結(jié)直腸癌模型中通過損害CLDN1依賴性生存顯示出臨床前療效。

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結(jié)語

盡管CLDN靶向療法的開發(fā)標(biāo)志著精準(zhǔn)腫瘤學(xué)的重要里程碑，但仍存在一些未解決的挑戰(zhàn)。為了優(yōu)化CLDN靶向，需要對其在腫瘤發(fā)生中的功能進行更深入的機制見解。完善患者選擇的生物標(biāo)志物策略對于成功的臨床開發(fā)至關(guān)重要。例如，CLDN18.2靶向治療的經(jīng)驗表明，納入低表達人群可能會損害靶向療法的療效，特別是對于單克隆抗體。然而，對于ADC、CAR T細胞和雙特異性抗體等新型模式，可能存在治療CLDN18.2表達較低的腫瘤的潛力。

此外，盡管正常組織與腫瘤的表達比例相對較低，但管理靶上、脫瘤毒性仍然是一個關(guān)鍵的轉(zhuǎn)化問題。CLDNs并非僅由腫瘤細胞表達，這增加了靶向治療時發(fā)生意外毒性的風(fēng)險。最后，聯(lián)合策略代表了擴展的一個主要領(lǐng)域，臨床試驗顯示，將CLDN18.2靶向治療與化療聯(lián)合比單獨使用抗體更有效。

參考資料：Claudin proteins as emerging therapeutic targets for solid tumours. Nat Rev Cancer. 2026 Mar 2.

       原文標(biāo)題 : Claudin蛋白作為實體瘤治療的新興靶點